pcr反應體系包括哪幾個組分的答案是：寡核苷酸(引物)；4種dNTP；TaqDNA聚合酶；靶序列DNA和PCR反應緩衝液體系
(1)引物長度- 一般15~ 30鹼基，過短則特異性低; 過長則會引起引物間的退火而影響有
效擴增。
(2) 避免內部二級結構，避免序列內有較長的迴文結構，使引物自身不能形成髮夾結構。
(3) G/C 和A/T 鹼基均勻分佈，G/C 含量在45%~ 55% 之間，引物鹼基序列儘可能選
擇鹼基隨機分佈，避免嘌呤、嘧啶的連續排列。
(4) 要避免兩個引物間特別是3' 末端DNA 序列互補以及同一引物自身3' 末端的序列互補，使它們不能形成引物二聚體或髮卡結構。
(5) 引物3' 端鹼基一般應與模板嚴格配對，並且3' 端為G、C 或T 時引發效率較高。
(6) 引物5' 端鹼基可不與模板匹配，可添加與模板無關的序列(如限制性內切酶的識別
位點、ATG 起始密碼子或啟動子序列等)。這些與原初模板並不配對的非互補序列在後續的循
不中將被帶到雙鏈DNA 中去，這樣反應產物不僅含有目的序列，同時在目的基因兩側又有了
的限制酶切位點，用相應的限制酶切割後即可將PCR 產物定向克隆到載體中。
類似於DNA的天然複製過程，其特異性依賴於與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火(復性）--延伸三個基本反應步驟構成：模板DNA的變性，模板DNA經加熱至94℃左右一定時
間後，使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結合，為下輪反應作準備；模板DNA與引物的退火(復性)，模板DNA經加熱變性成單鏈後，温度降至40~60℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合；引物的延伸，DNA模板--引物結合物在DNA聚合酶的作用下，於72℃左右，以dNTP為反應原料，靶序列為模板，按鹼基配對與半保留複製原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留複製鏈重複循環變性--退火--延伸三過程，就可獲得更多的“半保留複製鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環的模板。每完成一個循環需2～4分鐘，2～3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。
