基因重組技術中，切割dna用限制性內切核酸酶，重組DNA技術即基因工程，是對攜帶遺傳信息的分子進行設計和改造的分子工程，包括基因重組、克隆和表達。在重組技術中，需要一些工具酶進行基因操作。其中對目的基因進行處理時需限制性內切核酸酶在準確的位置切割DNA，使較大的DNA分子成為一定大小的DNA片段。
限制性核酸內切酶是可以識別並附着特定的脱氧核苷酸序列，並對每條鏈中特定部位的兩個脱氧核糖核苷酸之間的磷酸二酯鍵進行切割的一類酶，簡稱限制酶。根據限制酶的結構，輔因子的需求切位與作用方式，可將限制酶分為三種類型，分別是第一型（Type I）、第二型（Type II）及第三型（Type III）。Ⅰ型限制性內切酶既能催化宿主DNA的甲基化，又催化非甲基化的DNA的水解；而Ⅱ型限制性內切酶只催化非甲基化的DNA的水解。Ⅲ型限制性內切酶同時具有修飾及認知切割的作用。
